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人溶血補體ELISA試劑盒實驗原理

發(fā)布時間:2020-07-07   點擊次數(shù):1286次

人溶血補體ELISA試劑盒實驗原理

性狀:盒裝液體

貯藏條件:2-8℃低溫保存

有效期:6個月

注意要點:請仔細閱讀產(chǎn)品的詳細使用說明,嚴格遵照規(guī)定操作,必能得出準確的結(jié)果。

用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。

特異性:同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。

檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。

適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床

標本:血清、、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

運輸方面:現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨

ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。

服務(wù)承諾:工作時間內(nèi)免費技術(shù)咨詢和指導(dǎo),提供來樣檢測及免費代測服務(wù),保證實驗結(jié)果的有效性。

研究領(lǐng)域:炎癥研究、生物學、研究、新陳代謝、信號通路、免疫學、傳染病、其他研究。

免費代測,從標本收集、保存、預(yù)試驗、實驗、數(shù)據(jù)分析等全實驗過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。


 1.  血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.  組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標本溶血會影響后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

 


1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.  設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.  樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
 

 

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