仁捷生物：人IL1β、 IL8、 TNF-α ELISA試劑盒文獻(xiàn)期刊

內(nèi) 科 2018 年12 月 第13 卷 第6 期  
早產(chǎn)兒血清、腦脊液炎癥因子水平與腦損傷的關(guān)系分析 
【摘要】 目的 探討早產(chǎn)兒血清、腦脊液炎癥因子水平與腦損傷的關(guān)系。方法 選取腦損傷早產(chǎn)兒46 例作為腦損傷 組，選取同期出生未合并腦損傷的早產(chǎn)兒46 例作為對(duì)照組。采集兩組早產(chǎn)兒出生后第1 天、第 3 天、第 7 天的血液及腦脊 液，檢測(cè)比較兩組早產(chǎn)兒血液及腦脊液的白介素1β( IL1β) 、白介素8( IL8) 、腫瘤壞死因子-α( TNF-α) 水平。將腦損傷組 早產(chǎn)兒按病情的嚴(yán)重程度分為輕、中、重度組，比較分析三組早產(chǎn)兒血液及腦脊液的 IL1β、 IL8、 TNF-α 水平。結(jié)果 腦損 傷組早產(chǎn)兒血清、腦脊液 IL1β、 IL8、 TNF-α 水平均顯著高于對(duì)照組( P ＜ 0． 05) ; 隨著出生時(shí)間( 病程) 的延長(zhǎng)，腦損傷組早 產(chǎn)兒血清、腦脊液以上各炎癥因子水平升逐漸高，腦損傷對(duì)血清 IL1β、 IL8、 TNF-α 水平的影響存在差異( P ＜0． 05) 。不同 病情嚴(yán)重程度的三組腦損傷早產(chǎn)兒血清及腦脊液 IL1β、 IL8、 TNF-α 水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P ＜0． 05) ，各炎癥因子 水平均隨出生時(shí)間的延長(zhǎng)而升高，病情嚴(yán)重程度對(duì)炎癥因子水平的影響與時(shí)間具有交互作用( P ＜0． 05) 。結(jié)論 早產(chǎn)兒血 清、腦脊液 IL1β、 IL8、 TNF-α 水平與其腦損傷的嚴(yán)重程度及病程有關(guān)。

實(shí)驗(yàn)原理：                                     

將目標(biāo)抗體包被于微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入微生物化的目標(biāo)抗體，將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后，加入HRP標(biāo)記和親和素，再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（O.D.值），計(jì)算樣品濃度。

技術(shù)小提示：

1. 當(dāng)混合或重溶蛋白溶液時(shí)，盡量避免起沫。

2. 為了避免交叉感染，配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請(qǐng)分別使用不同的移液槽。

3. 每次孵育時(shí)，請(qǐng)正確使用封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

4. 混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無(wú)色，請(qǐng)避光保存；假如微孔板后，將由物色變成不同深度的藍(lán)色。

5. 終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致；加入終止液后，孔內(nèi)顏色由藍(lán)變黃；若孔內(nèi)有綠色，則表明孔內(nèi)液體未混勻；請(qǐng)充分混合。